Zenix体积排阻色谱柱

Zenix体积排阻色谱柱

供应商:

AUPOS

简 介:

概述 Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 m硅胶作为填料。3 m的粒径结合大的孔体积使其成为目前国际上分辨率最高的体积排阻柱。Aupos 科技独有

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400-1158-566

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概述

Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 μm硅胶作为填料。3 μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前国际上分辨率最高的体积排阻柱。Aupos 科技独有的表面键合技术保证了填料表面键合的最大化,使其具有高的化学稳定性及最小的非特异性吸附。Zenix系列体积排阻柱有100、150及300 Å三种孔径选择,广泛的应用于生物分子及水溶性聚合物的分离与分析。

优异的特性

  • 采用3 μm粒径填料
  • 具有最高的柱效及分辨率
  • 稳定的批间重现性
  • 高的蛋白回收率,且蛋白不易失活
  • 极低的非特异性吸附
  • 适用于常规生物样品的分离与制备,包括:蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒等。
  • 适用于中性聚合物的分析与纯化,包括:多糖、合成聚合物、纳米材料等。

图1. Zenix SEC的蛋白分子量校正曲线

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC (5 µm, 7.8x300 mm)
流动相: 150 mM phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
检测: UV 214 nm
进样体积: 10 µL
样品: 1. Thyroglobulin, 670 kD; 2. g-Globulin, 158 kD; 3. BSA, 66 kD; 4. Ovalbumin, 44 kD; 5. Myoglobin, 17.6 kD; 6. Ribonuclease A, 13.7 kD; 7. B12, 1.35 kD; 8. Uracil, 120 D

表1. Zenix SEC色谱柱技术参数表

固定相

Zenix SEC-100

Zenix SEC-150

Zenix SEC-300

材料

表面键合亲水薄膜的硅胶

表面键合亲水薄膜的硅胶

表面键合亲水薄膜的硅胶

颗粒大小

3 mm

3 mm

3 mm

孔径 (Å)

~ 100

~ 150

~ 300

蛋白分子量范围

100 - 100,000

500 - 150,000

5,000 – 1,250,000

水溶性聚合物分子量范围 

500-10,000

500-25,000

1,000-100,000

pH 稳定性

2 – 8.5,短时间可耐受 8.5-9.5

2 – 8.5,短时间可耐受 8.5-9.5

2 – 8.5,短时间可耐受 8.5-9.5

反压 (for a 7.8x300 mm)

~ 1,500 psi  

~ 1,500 psi  

~ 1,500 psi

最大耐受压力 (psi)

~ 4,500

~ 4,500

~ 3,500

盐浓度范围

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

最高使用温度 (℃)

~ 80

~ 80

~ 80

流动相的兼容性

常规水相及有机相溶剂

常规水相及有机相溶剂

常规水相及有机相溶剂


最高的分辨率

图2. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分离蛋白混合物A
Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流动相: 150mM PBS, pH 7.0
流速: 7.8x300 mm为1.0 mL/min;4.6x300 mm为0.35 mL/min
温度: 室温(~23℃);  检测波长: 214nm
进样量: 10 μL(4.6x300 mm为3 μL)
样品: 1)甲状腺球蛋白(1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚体, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核酸酶A(1.0 mg/L), 13.7 kD; 5)尿嘧啶(2.5 mg/mL), 120 D

表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率

蛋白

Zenix 300 
(4.6x300)

Zenix 300
(7.8x300)

SRT 300
(7.8x300)

1

甲状腺球蛋白

2180

1730

1120

2

BSA二聚体

4390

4600

2720

3

BSA

10280

13090

6590

4

核糖核酸酶A

16490

22000

11160

5

尿嘧啶

33640

38500

27860

开发小粒径填料的优势在于能实现更高的分离效率和分辨率。当粒径从5 μm降至3 μm时,柱效几乎为原先的两倍。如图2和表2所示:当填料粒径从5 μm降至3 μm时,BSA二聚体、BSA、核糖核酸酶A的塔板数分别从2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。图3和表3进一步表明3 μm Zenix柱在分离各种蛋白时能实现更高的分离效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm长的Zenix柱时能够达到40,000的塔板数。

图3. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300(内径为7.8 mm)分离蛋白混合物A

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)
流动相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
反压: Zenix SEC-300为1,375 psi, Zenix SEC-150为1,100psi
温度: 室温(~ 23℃)
检测波长: 214 nm
进样量: 10 μL
样品: 1)甲状腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚体, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 mg/mL), 120 D.
表3. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率 (内径为7.8 mm)


蛋白

Zenix 150

Zenix 300

1

甲状腺球蛋白

18050

2460

2

BSA二聚体

2420

5110

3

BSA

5620

13090

4

核糖核酸酶A

17600

22000

5

尿嘧啶

42000

38500

图4. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300(内径为7.8 mm)分离蛋白混合物B

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
反压: Zenix 300为1,375 psi;  Zenix 150为1,100 psi
温度: 室温 (~ 23℃)
检测波长: 214 nm
进样量: 10 μL
样品: 1) 甲状腺球蛋白, 670 kD; 2) g-球蛋白,158 kD; 3)卵清蛋白, 44 kD; 4) 核糖核酸酶A, 13.7 kD; 5) p-氨基苯甲酸, 137 D.
表4. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率(内径为7.8 mm)

蛋白

Zenix 150

Zenix 300

1

甲状腺球蛋白

12850

1450

2

g-球蛋白

2860

3650

3

卵清蛋白

6780

11760

4

核糖核酸酶A

17730

21690

5

p-氨基苯甲酸

41900

39400

高载样量

载样量是衡量体积排阻色谱柱性能的重要指标之一,下图表明Zenix系列分析色谱柱在BSA上样量高达500 µg的情况下,仍保持着完美的分析峰形。

图5. Zenix SEC-150 色谱柱对BSA载样量的测试图谱
Zenix体积排阻色谱柱
色谱柱: Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
进样量: 10 µL
检测波长: UV214 nm

图6. Zenix SEC-300 色谱柱对BSA载样量的测试图谱
Zenix体积排阻色谱柱
色谱柱: Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
进样量: 10 µL
检测波长: UV 214 nm

 高稳定性

Aupos 科技独有的表面修饰技术使得硅胶表面的键合密度达到最大化,从而阻止了能够促进键合相脱落的溶剂分子向薄膜内侧的扩散,保证了其在pH 2-8.5范围的稳定使用。Zenix体积排阻柱适用于大多数水性及有机溶剂,包括:醋酸、磷酸、Tris缓冲盐体系、甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等,同时可耐受高盐溶液,如2.0 M的NaCl。

流动相的兼容性

Zenix SEC固定相能与大多水相缓冲液兼容,如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。Zenix SEC固定相能够承受高浓度盐,如2.0 M。同时Zenix SEC柱在有机溶剂中,如甲醇、乙醇、四氢呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亚砜等,水和有机溶剂混合相中均能保持稳定。

高的蛋白回收率

Zenix SEC固定相为亲水性和中性,蛋白和其他生物分子与固定相之间的非特异性吸附可忽略。可抑制蛋白吸附到硅胶固定相表面的作用,从而能够实现蛋白高的回收率,在分离后能够保持蛋白的活性。酸性和碱性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能够高于95%。

应用实例

图7. 抗体的分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 mm, 7.8×300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH=7.0
流速: 1.0 mL/min;  检测波长: UV 280nm
进样量: 5 µL;  样品: Antibody-2

图8. PEGylated-protein的分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 mm, 7.8×300 mm)
  SRT SEC-150, (5 mm, 7.8 ×300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH=7.0
流速: 1.0 mL/min;  检测波长: UV 280nm
进样量: 20 µL;  样品: PEGylated-protein

图9. 抗体融合蛋白的分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 um ,7.8×300 mm)
流动相: 50 mM PB+100 mM Nacl(pH: 7.0±0.1)
流速: 0.5 ml/min
进样量: 30 µL
检测波长: UV 280 nm

图10. 大肠杆菌发酵液的分离
Zenix体积排阻色谱柱
色谱柱: Zenix SEC ,3 µm, 7.8x300 mm
流动相: 0.15 M PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
检测波长: UV 280 nm
进样量: 10 µL
样品: E. coli lysate (2.5 mg/mL)

图11.干扰素IFNα2b的分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 mm, 7.8×300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH=7.0
流速: 1.0 mL/min
检测波长: UV 280 nm
进样量: 20 µL
样品: IFNα2b

图12.多肽的分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 mm, 7.8×300 mm)
  SRT SEC-150, (5 mm, 7.8×300 mm)
流动相: 150 mM PBS, pH=7.0
流速: 1.0 mL/min; 
检测波长: UV 280 nm
进样量: 20 µL; 
样品: Peptide

图13.头孢地嗪钠分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 mm, 7.8×300 mm)
流动相: 5 mM Phosphate Buffer (pH=7.0) : ACN = 95 : 5 (V/V)
流速: 0.8 mL/min  
温度: 室温
检测波长: UV 231 nm
进样量: 20 µL
样品: 头孢地嗪钠

图14.胰岛素的分析

Zenix体积排阻色谱柱

色谱柱: Zenix SEC-150, (3 mm, 7.8x300 mm)
流动相: 0.1%精氨酸 : 乙腈 : 冰乙酸=65:20:15
流速: 0.5 mL/min  
温度: 室温
检测: 276 nm
进样量: 100 µL
样品: 胰岛素

图14. Zenix SEC-150、300对Biorad混标蛋白的分离

Zenix体积排阻色谱柱

Columns: Zenix SEC (3 µm, 7.8x300 mm)
Mobile phase: 0.15 M PBS, pH 7.0
Flow rate: 1.0 mL/min
Detection: UV 214 nm
Injection: 10 µL
Sample: 1) Thyroglobulin, 670 kD; 2) g-Globulin, 158 kD; 3) Ovalbumin, 44 kD; 4) Myoglobulin, 16.9 kD; 5) Vitamin B12, 1355 D.
表2. Zenix SEC-150、300柱效对比

Peak

Protein

Zenix 150
7.8x300 mm

Zenix 300
7.8x300 mm

1

Thyroglobulin

12420

1760

2

g-Globulin

2860

3650

3

Ovalbumin

6620

11760

4

Myoglobulin

15020

20810

5

Vitamin B12

34370

35460

订购信息
Zenix SEC-100

产品名称

粒度

孔径

规格

订货号

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

21.5x600 mm

003100-21560

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

21.5x300 mm

003100-21530

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

7.5x600 mm

003100-7560

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

7.8x300 mm

003100-7830

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

7.8x150 mm

003100-7815

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

7.8x50 (Guard)

003100-7805

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

4.6x300 mm

003100-4630

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

4.6x150 mm

003100-4615

Zenix SEC-100

3 um

100 Å

4.6x50 (Guard)

003100-4605

Zenix SEC-150

产品名称

粒度

孔径

规格

订货号

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

21.5x600 mm

003150-21560

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

21.5x300 mm

003150-21530

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

7.5x600 mm

003150-7560

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

7.8x300 mm

003150-7830

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

7.8x150 mm

003150-7815

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

7.8x50 (Guard)

003150-7805

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

4.6x300 mm

003150-4630

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

4.6x150 mm

003150-4615

Zenix SEC-150

3 um

150 Å

4.6x50 (Guard)

003150-4605

Zenix SEC-300

产品名称

粒度

孔径

规格

订货号

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

21.5x600 mm

003300-21560

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

21.5x300 mm

003300-21530

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

7.5x600 mm

003300-7560

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

7.8x300 mm

003300-7830

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

7.8x150 mm

003300-7815

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

7.8x50 (Guard)

003300-7805

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

4.6x300mm

003300-4630

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

4.6x150 mm

003300-4615

 Zenix SEC-300

3 um

300 Å

4.6x50 (Guard)

003300-4605

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