维生素的液相色谱分离分析检测

发布日期:2018-05-31 08:16 字号:

    维生素是人体内代谢过程中起重要作用的物质,人体所需维生素量很少,但却是构成生命活动不可缺少的营养物质,除少数维生素可在人体内合成外,大多数维生素都必需由食物中摄取。
    维生素种类很多,在化学结构上并无共性,它们可为胶类(Vb1),醛类(Vb6)或醇类(Va)。根据其物理性质可分为水溶性维生素(如Vc,Vb1、Vr2)和油溶性维生素(如Va,Vd,Ve)两大类。
    用反相离子对色谱分离水溶性维生素如图6-4-44所示。色谱柱为Biophase ODS(5μm,φ4.6mm*250mm),流动相:(A)1% 乙酸 + 0.5%三乙胺溶液(pH=4.5);(B)A + 甲醇(50:50)。梯度洗脱程序在0-10min 内,流动相 B 由 0 增至,再维持15min。流量为1mL/min,用UVD(275nm)检测。样品溶于流动相 A 中进样。三乙胺的浓度对Vb1、Vb6、烟酸和Vk3的分离影响很大;Vk3样品中应加入Na2SO3以避免2- 甲基萘醌的生成;Vr12和烟酸在一起时不稳定应在测定时现配现用。
  
    水溶性维生素也可在反相键合相柱(C8)或胺基键合相柱(μ- Bonddapak - NH2)实现分离。
    油溶性维生素可用反相键合相柱分离,见图6-4-45。色谱柱为Permaphase OSE(30μm(薄壳型),φ2.1mm*1000mm),流动相 A 为H2O;B 为CH3OH。梯度洗脱程序是 B 以5%/min的梯度增加;流量为2mL/min;柱温 70℃;用UVD(254nm)检测。
    维生素 E(生育酚)的α、β、γ、δ异构体可用反相键合相柱进行分离,见图6-4-46。色谱柱为Lichrospher WP200 - C30(3μm,孔径20mn,φ4.6mm*250mm);流动相为甲醇;流量分别为(a)1mL/min 和(b)0.3mL/min。用UVD(295nm)检测。

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